靈芝菌株的DNA指紋分析 羅聯(lián)忠　 林樹錢　 謝寶貴　 林志彬　 摘　要：CTAB法提取靈芝菌絲體總DNA,再以核糖體DNA轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(ITSⅡ、IGR IPCR RFLP)結(jié)合隨機引物擴增多態(tài)性(RAPD)標記分析30個靈芝菌株間的親緣關(guān)系.結(jié)果表明,ITSⅡ、IGR I-PCR RFLP產(chǎn)生了47條帶,其中42條顯示出多態(tài)性,通過聚類分析將30個菌株分成七大類,包括紫芝、黑靈芝、樹舌靈芝、薄樹靈芝四大類,以及另外三個無法確定具體歸屬的類群,但沒能將赤芝與松杉靈芝區(qū)分開.RAPD從247個隨機引物中篩選出8個隨機引物,共檢測到69個多態(tài)性位點并全部顯示出多態(tài)性,通過聚類分析將供試的30個靈芝菌株全部區(qū)分開. 關(guān)鍵詞：靈芝;核糖體DNA轉(zhuǎn)錄間隔區(qū);隨機引物擴增多態(tài)性 分類號：S567.310.1 　文獻標識碼：A 文章編號：1005-9873(2005)03-0007-07 DNA Fingerpinting Analysis of Ganoderma Strains LUO Lian-zhong　 LIN Shu-qian　 XIE Bao-gui　 LIN Zhi-bin　 基金項目：綠谷集團有限公司靈芝專項科研資金全額資助項目"靈芝菌種DNA鑒別"(項目編號:2003SHGV01),福建省星火計劃項目"福建食用菌集聚產(chǎn)業(yè)科技服務(wù)體系建設(shè)示范--食用菌種質(zhì)資源庫建設(shè)、分類與認定前期技術(shù)研究"(項目編號:2003EAT20021)的部分研究內(nèi)容 作者簡介：羅聯(lián)忠(1978-),男,2004年畢業(yè)于福建農(nóng)林大學,碩士,主要從事藥用真菌的種質(zhì)資源收集與分子鑒定等工作,發(fā)表主筆論文4篇. 作者單位：羅聯(lián)忠（福州綠谷生物藥業(yè)技術(shù)研究所,福州,350002;福建農(nóng)林大學菌物研究中心,福州,350002）　 　　　　　林樹錢（福州綠谷生物藥業(yè)技術(shù)研究所,福州,350002）　 　　　　　謝寶貴（福建農(nóng)林大學菌物研究中心,福州,350002）　 　　　　　林志彬（福州綠谷生物藥業(yè)技術(shù)研究所,福州,350002;北京大學醫(yī)學部藥理系,北京,100083）　 參考文獻： [1]趙繼鼎,張小青.中國真菌志(第十八卷,靈芝科)[M].北京:科學出版社,2000.25. [2]中華人民共和國藥典委員會.中華人民共和國藥典[M].北京:化學工業(yè)出版社,2000.222. [3]衛(wèi)生部.衛(wèi)生部關(guān)于印發(fā)真菌類和益生菌類保健食品評審規(guī)定的通知[B].衛(wèi)法監(jiān)發(fā)[2001]84號. [4]Makimura K. Phylogenetic classification and species identification of dermatophyte strains based on DNA sequences of nuclear ribosomal internal transcribed spacer 1 regions[J]. Clin Microbiol, 1999,37(4):920. [5]李國利.16S～23S rDNA內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)序列分析及其在分支桿菌鑒定中的應(yīng)用價值[J].中華結(jié)核和呼吸雜志,2002,25(3):166. [6]Williams JG, Kubelik AR, Livak KJ, et al. DNA polymorphisms amplified by arbitrary primers are useful genetic markers[J]. Nuc Axids Res, 1990,18:6531～6535. [7]Welsh J, McClelland M. Fingerprinting genomes using PCR with arbitrary primers[J]. Nuc Acids Res, 1990,18:7214～7218. 食用菌學報 2005年第3期-HTM文件 No.2