平菇三級(jí)菌種(栽培種)制備:栽培種培養(yǎng)基的原料和配方將原種轉(zhuǎn)接到同一培養(yǎng)基上進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng),即為栽培種。所以栽培種培養(yǎng)基的原料和配方與原種培養(yǎng)基的相仿。
上述提供的平菇原種培養(yǎng)基配方,不做任何改變均可作為平菇栽培種配方。栽培種培養(yǎng)基制作栽培種培養(yǎng)基制作方法與原種制作方法相同栽培種多采用塑料薄膜袋來(lái)進(jìn)行培養(yǎng),塑料袋裝量多,價(jià)格便宜,易于運(yùn)輸,使用也方便。栽培種用高壓鍋滅菌時(shí),必須用005毫米厚的聚丙烯塑料袋;聚丙烯袋耐高溫高壓,高壓滅菌時(shí)不會(huì)變形。用普通蒸鍋常壓滅菌時(shí),可選用035~004毫米厚的高密度聚乙烯塑料袋。袋的規(guī)格有兩種,一種是寬17厘米長(zhǎng)35厘米的折角袋,裝料與扎口方法和原種袋相同。
另一種是用寬17厘米的筒料,裁成3335厘米的段,一端在使用前用塑料繩扎口,裝料后再用塑料繩把另一端口扎好,扎繩緊貼料面,繩結(jié)外側(cè)留有2厘米的長(zhǎng)度,為以后接放的菌種留有余地。栽培種接種栽培種接種就是把原種接入栽培種培養(yǎng)料的過(guò)程。栽培種接種過(guò)程也要按照無(wú)菌操作的要求,可在接種室、接種帳進(jìn)行,但要減少進(jìn)、出次數(shù)和增加接量。
原種接入栽培種培養(yǎng)料時(shí),用長(zhǎng)柄鑷子或接種鏟挖取大棗大小1塊原種,放入塑料袋培養(yǎng)料中央的洞口;也可用鑷子先將瓶?jī)?nèi)原種弄碎,然后瓶口對(duì)著袋口倒入弄碎的原種,使菌種撒在料面上,塞上棉塞,將塑料袋口包扎好。一般1瓶原種可接種30袋一端封口的袋裝栽培種、60瓶瓶當(dāng)加大接種量,這樣菌絲延快,培養(yǎng)時(shí)間可相應(yīng)縮多可裝我種,12一5兩端開的袋裝栽培種如原種充足栽培種菌齡是自接種之日開始計(jì)算的,不同種類的食用菌栽培種生長(zhǎng)速度不同,因此最適菌齡也就不同。
但是,無(wú)論菌絲長(zhǎng)得快慢。均是菌絲長(zhǎng)滿瓶(袋)后的7天內(nèi)是使用的最佳菌齡。此期正是菌種的青壯年時(shí)期,菌絲分布均勻,細(xì)胞內(nèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)積累充足,生命力旺盛,轉(zhuǎn)接后吃料快。菌種長(zhǎng)滿后,隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng),菌種逐漸老化,培養(yǎng)基失水,菌種干縮,活力下降。因此,栽培種菌絲長(zhǎng)滿瓶(袋)后要及時(shí)使用。栽培種是用于接種栽培出菇袋的,用種量多對(duì)菌袋培養(yǎng)基的覆蓋面大、發(fā)菌快,可以控制雜菌污染和有效地縮短發(fā)菌時(shí)間,提早出菇。但是菌種不能作為培養(yǎng)基使用,所以對(duì)產(chǎn)量的提高沒有關(guān)系,也就是說(shuō)不存在栽培種用量越大產(chǎn)量就越高的說(shuō)法。
用種量過(guò)大還會(huì)出現(xiàn)菌袋的污染問(wèn)題,如接種時(shí)菌種的菌絲被打斷,堆積在出菇袋內(nèi),菌種受傷后呼吸強(qiáng)烈,產(chǎn)生很大的熱量分泌出很多的水分,若不能及時(shí)散發(fā)出去,就容易引起燒菌和死亡現(xiàn)象;死亡的菌絲被雜菌侵染后又感染新菌袋,則造成菌袋報(bào)廢。另外,菌種的菌絲菌齡比新接種的菌絲長(zhǎng)30多天,容易在菌袋內(nèi)出菇,影響菌袋的正常發(fā)菌。因此,接種時(shí)用種量應(yīng)以覆蓋培養(yǎng)面為宜,不應(yīng)過(guò)量用種。栽培種菌絲培養(yǎng)栽培種菌絲培養(yǎng)請(qǐng)參見原種菌絲培養(yǎng)。
菌種保藏和貯藏:1.菌種保藏菌種保藏的目的在于在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)保持菌種的生存,保持菌種形態(tài)、遺傳、生理等優(yōu)良的農(nóng)藝性狀的穩(wěn)定,保持其純培養(yǎng)狀態(tài),免受其他生物的侵染菌種的保藏方法有很多,常用的有繼代培養(yǎng)低溫保藏、液體石蠟覆蓋保藏、蒸餾水覆蓋低溫保藏、超低溫冰箱保藏和液氮超低溫凍結(jié)保藏。
繼代培養(yǎng)低溫保藏將菌種放在4℃~6℃恒溫箱中保藏3~6個(gè)月,然后重新進(jìn)行移接,移接后再放回恒溫箱內(nèi)繼續(xù)保藏。此法是目前普遍采用的方法,優(yōu)點(diǎn)是應(yīng)用儀器設(shè)備簡(jiǎn)單,操作方便、簡(jiǎn)便易行。缺點(diǎn)是菌種退化快,較長(zhǎng)時(shí)間保藏后常出現(xiàn)菌絲生長(zhǎng)緩慢,甚至不能生長(zhǎng)現(xiàn)象,有的品種還會(huì)形成色素。液體石蠟覆蓋保藏將無(wú)菌的液體石蠟覆蓋于菌種斜面表面,隔絕菌種的氧氣供應(yīng),以控制生長(zhǎng),減緩老化,減少變異。此法有時(shí)會(huì)出現(xiàn)大量分泌色素、發(fā)生角變、菌絲變稀弱、生長(zhǎng)不正常等問(wèn)題蒸餾水覆蓋低溫保藏將無(wú)菌蒸餾水注入需要保藏菌種的斜面菌種內(nèi),然后把菌袋(瓶)直立放置于4℃~6℃恒溫箱保藏,此法常被用作菌種的短期保藏,1年左右需要繼代培養(yǎng)1次。超低溫冰箱保藏此法需要超低溫冰箱,溫度控制在-76℃~-80℃,可以長(zhǎng)期保藏。液氮超低溫凍結(jié)保藏此法是將菌種置于保護(hù)劑中,經(jīng)程序降溫至-90℃,將菌種置于液氮容器中長(zhǎng)期保藏。
2.菌種貯藏菌種貯藏的目的在于防止因污染減緩菌種的代謝和造成衰老,保持菌種活力和純培養(yǎng)狀態(tài),使之處于隨時(shí)可用的生理狀態(tài),保持菌種的商品質(zhì)量。菌種貯藏有以下基本要求。(1)環(huán)境衛(wèi)生菌種貯藏場(chǎng)所要干燥、潔凈,遠(yuǎn)離石灰場(chǎng)、水泥場(chǎng)等粉塵大量發(fā)生地,以防粉塵導(dǎo)致的污染。(2)環(huán)境濕度和通風(fēng)貯藏場(chǎng)所不可濕度過(guò)大,要保持空氣流通良好,以帶走菌種呼吸而產(chǎn)生的大量水分,使空氣相對(duì)濕度保持在6%以下,以防污染。(3)避光光照可加快菌絲老化,刺激子實(shí)體形成,子實(shí)體形成將消耗菌種的大量養(yǎng)分。
因此,菌種貯藏要避光,以避免子實(shí)體形成(4)適度分散貯藏期間菌種仍處于代謝狀態(tài),其代謝的活躍程度主要取決于貯藏場(chǎng)所的溫度。當(dāng)菌種緊密疊放時(shí),代謝熱不能較快地散出,代謝產(chǎn)生的水分也不能及時(shí)排出,不利于菌種質(zhì)量的保持。(5)減少人員出入過(guò)多的人來(lái)人往,易導(dǎo)致貯藏場(chǎng)所溫度升高,同時(shí)空氣流動(dòng)使空氣中懸浮物增加,易造成污染。因此菌種貯藏場(chǎng)所要盡量減少人員的出入,除定期定時(shí)的菌種貯藏狀態(tài)檢查外,應(yīng)禁止一切無(wú)關(guān)人員的出入。
3.平菇菌種的貯存時(shí)間當(dāng)培養(yǎng)基上長(zhǎng)滿菌絲后,如果菌種暫時(shí)不用,可放置于較低的溫度下貯藏。母種在4℃~6℃條件下可貯藏時(shí)間90天,原種在4℃~6℃條件下可貯藏45天,栽培種在25℃以下條件下可貯藏10天、在1℃~6℃條件下可貯藏45天。