【作者】曹叔楠 魏江春
【機(jī)構(gòu)】河北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 中國科學(xué)院微生物研究所真菌地衣系統(tǒng)學(xué)重點實驗室
摘要：為從荒漠地衣共生菌中篩選耐旱基因,以分離自荒漠地衣糙聚盤衣Glypholecia scabra的共生菌為實驗材料,研究了在水分脅迫條件下其耐旱生物學(xué)特性的變化情況。結(jié)果顯示:在低水分活度條件下,糙聚盤衣共生菌通過積累可溶性糖含量維持細(xì)胞滲透壓,通過增加抗氧化物質(zhì)多酚及還原型谷胱甘肽的含量清除活性氧物質(zhì)。初步推測與多酚和還原型谷胱甘肽代謝相關(guān)基因為耐旱基因的候選基因,在水分活度aw=0.90,aw=0.85時,可以誘導(dǎo)候選基因大量表達(dá)。此外,為給克隆與表達(dá)分析耐旱基因提供足夠菌種,通過Plackett-Barman實驗和正交實驗對其培養(yǎng)條件進(jìn)行了優(yōu)化。其最佳液體培養(yǎng)基為:土豆浸汁1L,葡萄糖15g,大豆蛋白胨2g,鈷胺素(VB12)200μg;最佳培養(yǎng)條件為:溫度18℃,pH6.3,裝瓶量150mL/250mL,搖床轉(zhuǎn)速為100r/min。糙聚盤衣共生菌生長曲線顯示,通過優(yōu)化培養(yǎng)條件可使其生物量顯著提高。
基金：國家自然科學(xué)基金(No.3067004)； 國家高新技術(shù)攻關(guān)項目“863”計劃(No.2007AA021405)；
關(guān)鍵詞：耐旱基因; 水分脅迫; 正交實驗; 生長曲線;