【作者】榮躍文 徐莉 汪小艷 李春如 樊美珍 李增智
【機構(gòu)】安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)微生物防治省重點實驗室
摘要：對高雄山蟲草無性型細腳擬青霉的酶解條件、原生質(zhì)體制備、電泳條件和核型進行了研究。以10mg/mL相同濃度的溶壁酶、纖維素酶和蝸牛酶配成混合酶解液,在30℃、120r/min振蕩處理18h菌齡的菌絲2.5h,獲得約107個/mL的原生質(zhì)體懸浮液。濃縮至約108個/mL原生質(zhì)體懸浮液與1.4%的低熔點瓊脂糖等體積混合制膠,50℃蛋白酶K酶解48h,ET液洗3次(每次1h),浸沒,4℃保存。以溫漢遜氏酵母Hansenula wingei YB-4662-VIA和粟酒裂殖酵母Schizosaccharomyces pombe 972h-染色體DNA作為標準,利用鉗位均勻電場脈沖電泳系統(tǒng)電泳,細腳擬青霉染色體組被分離成8條帶,利用AlphaEase Fc軟件分析,估計其大小在0.43-5.78Mb之間,大小分別為:0.43、2.45、2.55、2.88、3.28、3.94、4.70、5.78Mb,推測細腳擬青霉核型大小約為26.01Mb。
基金：國家高技術(shù)研究發(fā)展計劃資助項目(863計劃)(No.2007AA021506)； 國家自然科學(xué)基金(No.30570004)； 安徽省自然科學(xué)基金(No.070411011)；
關(guān)鍵詞：蟲生真菌; 原生質(zhì)體; 鉗位均勻電場電泳; 染色體組;
【機構(gòu)】安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)微生物防治省重點實驗室
摘要：對高雄山蟲草無性型細腳擬青霉的酶解條件、原生質(zhì)體制備、電泳條件和核型進行了研究。以10mg/mL相同濃度的溶壁酶、纖維素酶和蝸牛酶配成混合酶解液,在30℃、120r/min振蕩處理18h菌齡的菌絲2.5h,獲得約107個/mL的原生質(zhì)體懸浮液。濃縮至約108個/mL原生質(zhì)體懸浮液與1.4%的低熔點瓊脂糖等體積混合制膠,50℃蛋白酶K酶解48h,ET液洗3次(每次1h),浸沒,4℃保存。以溫漢遜氏酵母Hansenula wingei YB-4662-VIA和粟酒裂殖酵母Schizosaccharomyces pombe 972h-染色體DNA作為標準,利用鉗位均勻電場脈沖電泳系統(tǒng)電泳,細腳擬青霉染色體組被分離成8條帶,利用AlphaEase Fc軟件分析,估計其大小在0.43-5.78Mb之間,大小分別為:0.43、2.45、2.55、2.88、3.28、3.94、4.70、5.78Mb,推測細腳擬青霉核型大小約為26.01Mb。
基金：國家高技術(shù)研究發(fā)展計劃資助項目(863計劃)(No.2007AA021506)； 國家自然科學(xué)基金(No.30570004)； 安徽省自然科學(xué)基金(No.070411011)；
關(guān)鍵詞：蟲生真菌; 原生質(zhì)體; 鉗位均勻電場電泳; 染色體組;