【作者】張洪 丁可 裴國(guó)亮 郭軍 康振生
【機(jī)構(gòu)】西北農(nóng)林科技大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院陜西省農(nóng)業(yè)分子生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室
摘要：胞質(zhì)游離鈣離子變化與植物病原真菌侵染寄主的動(dòng)態(tài)過(guò)程具有重要的關(guān)聯(lián)性。本研究以侵染小麥葉片的條銹菌31號(hào)生理小種(CYR31)為材料,以孵育法將Ca2+熒光探針Fluo-3-AM載入到小麥條銹菌細(xì)胞中,并結(jié)合激光共聚焦掃描顯微技術(shù),建立了測(cè)定侵染過(guò)程中條銹菌胞質(zhì)游離Ca2+分布的試驗(yàn)方法。結(jié)果表明,采用10μmol/L Fluo-3-AM裝載順次進(jìn)行低溫4℃孵育1h,25℃孵育1h,可獲得較為理想的條銹菌胞質(zhì)游離Ca2+染色結(jié)果。該方法可用于檢測(cè)不同侵染階段的小麥條銹菌細(xì)胞質(zhì)游離鈣離子的分布變化,為進(jìn)一步研究銹菌胞內(nèi)鈣離子動(dòng)態(tài)與侵染寄主的關(guān)聯(lián)性提供了技術(shù)支撐。
基金：國(guó)家自然科學(xué)基金(No.30671350)； 教育部科學(xué)技術(shù)研究重點(diǎn)項(xiàng)目(No.107104)； 教育部長(zhǎng)江學(xué)者和創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(No.IRT0558)； 高等學(xué)校學(xué)科創(chuàng)新引智計(jì)劃資助項(xiàng)目(No.B07049)；
關(guān)鍵詞：熒光指示劑; 孵育條件; 最適溫度;