【作者】彭軼楠王沛雅鞏曉芳祝英楊暉王治業(yè)周劍平

【機(jī)構(gòu)】甘肅省科學(xué)院生物研究所甘肅省微生物資源開(kāi)發(fā)利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室甘肅省科學(xué)院自然能源研究所

摘要：寡雄腐霉Pythium oligandrum是一種對(duì)動(dòng)、植物和環(huán)境無(wú)害,兼具殺菌和增產(chǎn)效果的生防真菌。本研究以0.8mol/L甘露醇與25mmol/L CaCl2和10mmol/L Tris-HCl作為滲透壓穩(wěn)定劑,使寡雄腐霉菌絲體在含有裂解酶、纖維素酶、破壁酶的復(fù)合酶系中酶解得到其原生質(zhì)體。此原生質(zhì)體通過(guò)液體振蕩培養(yǎng)的途徑恢復(fù)再生1d后涂于平板上可生長(zhǎng)為成熟菌體。本研究所述方法制備得到的寡雄腐霉原生質(zhì)體數(shù)量超過(guò)1×109CFU/m L,活性超過(guò)80%;通過(guò)液體培養(yǎng)再生途徑使得寡雄腐霉原生質(zhì)體再生率達(dá)32.9%。此方法操作簡(jiǎn)便,穩(wěn)定性好,獲得的寡雄腐霉原生質(zhì)體品質(zhì)高、數(shù)量多,完全能夠滿足后期基因遺傳轉(zhuǎn)化、細(xì)胞融合培養(yǎng)等研究應(yīng)用。 

基金：國(guó)家國(guó)際合作專(zhuān)項(xiàng)項(xiàng)目(2013DFA30950)； 甘肅省基礎(chǔ)研究創(chuàng)新群體計(jì)劃(1606RJIA325)； 甘肅省科學(xué)院創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)(CX201601)； 甘肅省軟科學(xué)研究計(jì)劃(1205ZCRA170)~~；

關(guān)鍵詞：寡雄腐霉; 生防真菌; 原生質(zhì)體; 制備及再生;