隨著人們對(duì)食用菌營養(yǎng)價(jià)值和藥用價(jià)值認(rèn)識(shí)的提高以及食用菌生產(chǎn)所帶來的經(jīng)濟(jì)效益的增加。食用菌育種工作也成為食用菌科技工作者關(guān)注的熱點(diǎn)之一。現(xiàn)對(duì)食用菌育種工作的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述，以期為食用菌的育種工作提供參考。
一、野生食用茵馴化育種
野生食用菌馴化栽培．是食用菌育種的重要內(nèi)容．栽培的食用菌品種絕大部分是由野生食用菌馴化而來的。例如：阿魏蘑的馴化工作．是中國科學(xué)院新疆生物土壤沙漠研究所于1983年開始的．當(dāng)時(shí)曹玉清、牟川靜、陳忠純等在研究馴化分布于新疆托里地區(qū)的野生阿魏側(cè)耳fP／eurotu~retainel時(shí)，對(duì)其形態(tài)特征、分類地位、氨基酸含量、生活條件(包括營養(yǎng)、pH值、溫度、濕度、光照和通風(fēng))、菌絲培養(yǎng)特征、馴化栽培等進(jìn)行了研究。觀察到分離的野生菌株K001、K002與K005在培養(yǎng)特征上的差異。1986年他們又在新疆木壘采集到Kill標(biāo)本．在進(jìn)一步研究中發(fā)現(xiàn)．K005、Klll在子實(shí)體外部形態(tài)與菌絲培養(yǎng)特征上與阿魏側(cè)耳顯著不同。經(jīng)研究定名為阿魏側(cè)耳托里變種[Pieurotus ervngii(DC．ex． Fr)0ueI．var．tuoliensis Mou．n var]。他們1983年對(duì) K001、K002、K005菌株馴化栽培中．發(fā)現(xiàn)在有無寄主植物阿魏根屑添加在培養(yǎng)基中的情況下．用棉籽殼、云杉木屑、麩皮等原料組成的培養(yǎng)基上都相繼長出了子實(shí)體．阿魏側(cè)耳及托里變種自此得到推廣．首先在新疆開始人工栽培。已成為近年來大面積進(jìn)行商業(yè)性栽培的一種食用菌新品種。其菇體肥大、顏色潔白、菌肉細(xì)膩、質(zhì)地脆嫩、久燉不綿、清爽滑潤、味美可口、營養(yǎng)豐富．投入市場后深受人們的青睞。目前我國引進(jìn)和馴化栽培成功的食用菌已達(dá)80多個(gè)種。
二、 孢子分離育種
單孢分離就是將采集到的孢子群單個(gè)分開培養(yǎng)，讓其單獨(dú)萌發(fā)成菌絲而獲得純培養(yǎng)的方法。曹裕漢通過對(duì)草菇有性分離選育種研究．表明草菇孢子分離菌株在菌絲形態(tài)、生長速率、產(chǎn)厚垣孢子能力、出菇、產(chǎn)量等性狀上存在較大的差異?？梢栽诰z濃密、氣生菌絲多、能產(chǎn)生大量厚垣孢子的菌株中選擇到較高產(chǎn)量的菌株應(yīng)用于生產(chǎn)．解決草菇生產(chǎn)上出現(xiàn)的菌種老化、退化問題：潘保華采用稀釋鏡檢法對(duì)金針菇的6個(gè)品種．共計(jì)l 898個(gè)擔(dān)孢子分離培養(yǎng)．結(jié)果檢測出144個(gè)單孢結(jié)實(shí)菌株。這些菌株與其它非單孢結(jié)實(shí)菌株交配．篩選出6個(gè)強(qiáng)優(yōu)組合。這種通過組織分離．而后經(jīng)出菇或出耳試驗(yàn)，從中篩選出產(chǎn)量高、抗逆性強(qiáng)、遺傳性狀優(yōu)良的菌株再進(jìn)行擴(kuò)大繁殖的育種方法是目前采用最多的一種方法。
三、 食用茵雜交育種
食用菌雜交育種的基本原理是通過單倍體交配實(shí)現(xiàn)基因重組。雜交育種通過選擇適當(dāng)?shù)挠H本進(jìn)行交配．從雜交后代中選育出具有雙親優(yōu)良性狀的菌株，具有一定的定向性．這種育種方法適用于異宗結(jié)合的食用菌。賀建超等以雙孢蘑菇176和2796為親本菌株。通過單孢子雜交育種，經(jīng)過初篩、復(fù)篩和生產(chǎn)性試驗(yàn)．獲得一株新的穩(wěn)定的雙孢蘑菇雜交高產(chǎn)菌株。該雜交菌株具有發(fā)菌快、出菇早、產(chǎn)量高、顏色白、朵形較大、菌肉肥厚、抗逆性較強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。許益財(cái)?shù)冗x擇生態(tài)、種性等差異較大的長白山野生香菇和栽培品種A3-3為親本．采用平板稀釋法進(jìn)行單孢分離．單孢萌發(fā)及單核菌絲鏡檢、配對(duì)。從中選擇優(yōu)良組合“撫香一號(hào)”。該菌株符合育種目標(biāo)，是一個(gè)產(chǎn)量高、菇形圓正、肉厚、內(nèi)實(shí)、抗逆性強(qiáng)、耐高溫、遺傳性狀穩(wěn)定的優(yōu)良品種．可在北方作為更新?lián)Q代的優(yōu)良新品種：劉宇、陳文良等用杏鮑菇l號(hào)菌株和9號(hào)菌株通過單孢雜交育種方法選育出杏鮑菇13號(hào)雜交菌株．杏鮑菇13號(hào)雜交菌株的子實(shí)體產(chǎn)量最高．生物學(xué)效率達(dá)到109．20％。
四、食用茵誘變育種：
誘變育種是人為利用某些理化因子誘導(dǎo)食用菌遺傳因子發(fā)生突變．再從多種突變體中選出正突變菌株的方法。誘變育種是獲得優(yōu)良食用菌菌株的常用手段。目前來看對(duì)食用菌育種較為有效的理化因子包括60co、紫外線、離子束、激光、X射線、超聲波、快中子、亞硝酸、亞硝酸胍、氮芥、硫酸二乙酯等．研究人員根據(jù)各自的實(shí)驗(yàn)條件及不同菌種的特點(diǎn)選擇不同的誘變方法．在食用菌新菌種的選育工作中已取得了不少成果。
4．1 60Co輻射誘變育種
60Co在生物技術(shù)上的應(yīng)用，是育種方法學(xué)的重要發(fā)展。夏志蘭、艾辛等采用60C0射線誘變杏鮑菇菌絲．在輻照劑量為1 000Gy．劑量率為67．8Gy／h的條件下．經(jīng)過拮抗試驗(yàn)和酯酶同功酶電泳驗(yàn)證．選育出一株杏鮑菇新菌株．誘變菌株與供試菌株比較．菌絲積累量差異均達(dá)到極顯著水平；張卉、佟俊生等采用60co-γ射線誘變菌絲，在輻照劑量為1 000Gv．劑量率為67．8Gy／h的條件下。經(jīng)過拮抗試驗(yàn)和酯酶同功酶電泳驗(yàn)證．選育出一株巴西蘑菇新菌株。經(jīng)液體培養(yǎng)其胞外多糖產(chǎn)量較出發(fā)菌株提高12％。
4．2紫外線輻射誘變育種
紫外線是一種非電離輻射誘變劑．是誘變產(chǎn)生突變的重要手段。張淵、王謙等研究了茶薪菇原生質(zhì)體的形成及影響因素．并進(jìn)行了以原生質(zhì)體為材料的誘變育種工作．實(shí)驗(yàn)表明．培養(yǎng)5d的茶薪菇菌絲體酶解3h原生質(zhì)體數(shù)目達(dá)到最大．原生質(zhì)體經(jīng)紫外線照射20see．．致死率即達(dá)70％1~2上。再生菌株經(jīng)篩選后．原生質(zhì)體再生株C16和誘變株 C304產(chǎn)量較對(duì)照分別提高了42．7％和17．9％：李德舜、劉正學(xué)等通過對(duì)平菇“山大1號(hào)”原始菌株的擔(dān)孢子收集、UV誘變以及突變菌株的出菇性能、抗雜菌能力測試研究．從45個(gè)突變菌株中篩選出了2株很有潛力的菌株。6號(hào)菌株株形美觀，抗雜菌能力強(qiáng)、轉(zhuǎn)潮快．生物學(xué)效率較原始菌株提高了約34．3％，達(dá)177．1％；3號(hào)菌株表現(xiàn)為無孢突變，為平菇新品種的研究開發(fā)提供了一個(gè)很好的出發(fā)菌株㈣。
4．3離子注入誘變育種
離子柬誘變育種與傳統(tǒng)的輻射法及化學(xué)誘變劑相比．具有損傷輕、突變率高、突變譜寬、遺傳穩(wěn)定、易于獲得理想菌株等特點(diǎn)。付永前、張軍等對(duì)阿魏菇的孢子采用不同的注入劑量進(jìn)行注入。以抽真空的樣品為對(duì)照，經(jīng)固體培養(yǎng)、液體發(fā)酵后，利用苯酚——濃硫酸法測其胞內(nèi)、胞外多糖含量。經(jīng)反復(fù)的注入和篩選后．獲得了最佳的注入劑量和阿魏多糖高產(chǎn)菌株2a-3．對(duì)此菌株和對(duì)照進(jìn)行液體發(fā)酵．在不同的發(fā)酵時(shí)間內(nèi)對(duì)其發(fā)酵物鮮重及胞內(nèi)、胞外多糖含量進(jìn)行測定．得到了最佳發(fā)酵周期為4d．其胞內(nèi)多糖和胞外多糖含量分別較對(duì)照菌株提高了20．33％和18．53％。
4．4激光誘變育種
激光對(duì)生物體作用的研究已有40多年的歷史．隨著研究水平的深入．目前認(rèn)為，激光對(duì)生物體的影響主要是由于其熱、壓力、光和電磁場等幾方面的效應(yīng)。其中，熱效應(yīng)引起酶失活、蛋白質(zhì)變性，導(dǎo)致生物的生理、遺傳變異；壓力效應(yīng)使組織變形、破裂，引起生理及遺傳變異；電磁場效應(yīng)是由產(chǎn)生的自由基導(dǎo)致DNA損傷。引起突變；而光效應(yīng)則是通過一定波長的光子被吸收、躍遷到一定的能級(jí)。引起生物分子變異。李耀維、張素梅等用 He-Ne激光輻照誘變金針菇(Flammulina Velu． tipes)的原生質(zhì)體、菌絲體片段，分生孢子懸液，并進(jìn)行初篩、復(fù)篩及突變株遺傳穩(wěn)定性研究。結(jié)果表明：采用原生質(zhì)體進(jìn)行誘變．其正突變率、單株 SOD產(chǎn)量提高率、產(chǎn)SOD遺傳穩(wěn)定性均高于菌系體與分生孢子。激光誘變?cè)|(zhì)體是獲得金針菇 SOD高產(chǎn)株的有效途徑㈣；陳五嶺、姚勝利采用 He-Ne激光誘變選育的6株香菇．酯酶同工酶在親本相比。酶帶條紋數(shù)、遷移率等特征發(fā)生了明顯的改變．表明了在激光作用下。香菇菌絲體遺傳物質(zhì)發(fā)生了變異。所選育的香菇新菌種中試栽培結(jié)果表明：新菌種在相同生產(chǎn)條件下。生長周期平均縮短20d以上，香菇產(chǎn)量最低平均提高10％以上．最高可提高22．5％。
4．5空間誘變
空間誘變可以豐富食用菌的種質(zhì)資源．賈建航、邊銀丙將香菇、平菇、黑木耳、金針菇、靈芝等食用菌材料進(jìn)行了衛(wèi)星或高空氣球搭載．隨之進(jìn)行地面實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明，搭載材料在拮抗反應(yīng)、菌絲生長速度、出菇形態(tài)等方面明顯變異。RAPD分析結(jié)果也證實(shí)一些搭載菌株在DNA水平上發(fā)生了變異。以上結(jié)果表明．空間誘變可能為食用菌的遺傳育種提供新途徑。
五、 細(xì)胞融合技術(shù)
細(xì)胞融合技術(shù)是人們按照需要．使兩個(gè)不同遺傳特性的細(xì)胞。融合成一個(gè)新的雜種細(xì)胞．從而人工構(gòu)建新型細(xì)胞．這個(gè)細(xì)胞兼有兩個(gè)親代細(xì)胞的遺傳特性。
李省印、李孟樓等將16個(gè)平菇資源品種的菌絲體，在25℃、pH5．8-6．0環(huán)境下，分別用1．5％溶菌酶加0．6mol／L KCI穩(wěn)滲劑溶解其細(xì)胞壁2h。將獲得的原生質(zhì)體兩兩配對(duì)成39個(gè)組合，在30℃、 pH9、0．6 mol／L KCI穩(wěn)滲劑、不加融合促進(jìn)劑Ca- C12和PEG6000的融合條件下．得到種內(nèi)雜交融合子5株。其中4株融合子再生出菌絲體和子實(shí)體：同皿接種實(shí)驗(yàn)顯示．新菌株與其雙親具明顯的拮抗線。經(jīng)栽培試驗(yàn)與生產(chǎn)示范．新育的“優(yōu)生”1號(hào)品系表現(xiàn)適應(yīng)性強(qiáng)，優(yōu)質(zhì)、豐產(chǎn)、抗雜、耐熱。
平香1號(hào)是河北農(nóng)業(yè)大學(xué)利用細(xì)胞融合技術(shù)．培育的香菇(7402)與平菇(紫飽側(cè)耳)兩個(gè)屬間的遠(yuǎn)緣雜交新品系。平菇與香菇在生物學(xué)分類上分別屬于側(cè)耳屬和香菇屬。前者生長周期短、易栽培、產(chǎn)量高，但品質(zhì)較差；后者味道鮮美。平香一號(hào)細(xì)胞工程株子實(shí)體的氨基酸含量介于雙親之間．比平菇的氨基酸含量有所提高．比香菇的氨基酸含量有所下降。菌株在菌絲生長速度和產(chǎn)量(生物轉(zhuǎn)化率)方面都顯著超過雙親：金風(fēng)2—1是四川省農(nóng)科院土肥所微生物研究室利用獨(dú)創(chuàng)的細(xì)胞融合一融合核分裂技術(shù)，選育得到的金針菇、風(fēng)尾菇的科間雜交后代．它具備了親本金針菇叢生和朵數(shù)多的特點(diǎn)．又具備了風(fēng)尾菇朵大肉厚的特性．同時(shí)它突破了金針菇只能低溫出菇、風(fēng)尾菇只能在中溫條件下出菇的特性．是一個(gè)廣溫性菌株．從1990年開始已經(jīng)在全國19省市和省內(nèi)的60多個(gè)市地州縣大面積推廣應(yīng)用．據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)．已經(jīng)創(chuàng)產(chǎn)值5億元以上。
六、 轉(zhuǎn)基因育種
轉(zhuǎn)基因技術(shù)就是將人工分離和修飾過的基因?qū)氲侥康纳矬w的基因組中．從而達(dá)到改造生物的目的。張競、聶思惟等將MT基因用電擊法轉(zhuǎn)化平菇(Pjeurotu$ostreatusl。MT基因表達(dá)蛋白與金屬離子結(jié)合而形成絡(luò)合物．用Zn誘導(dǎo)．轉(zhuǎn)基因平菇能富集Zn．可對(duì)缺Zn的人群補(bǔ)充Zn．使平菇成為一種保健和治療的食品或蔬菜。出菇試驗(yàn)結(jié)果表明．在米糠與鋸沫比為1：3的培養(yǎng)基上生長．在米糠與鋸沫比為1：4的培養(yǎng)基上不生長。24d菌絲可在廣口瓶中長滿，用于子實(shí)體培養(yǎng)。
回顧食用菌育種方法的歷史．可發(fā)現(xiàn)育種的手段和技術(shù)在不斷發(fā)展和完善。最初人們認(rèn)為食用菌可以馴化。出現(xiàn)了野生食用菌馴化技術(shù)。后來隨著對(duì)遺傳變異現(xiàn)象的認(rèn)識(shí)．出現(xiàn)了誘變育種技術(shù)．提高了微生物自發(fā)突變率，這就為選育高產(chǎn)、耐高溫、多糖含量高的優(yōu)質(zhì)食用菌開辟了新的途徑。幾乎與誘變育種在同一時(shí)期．在對(duì)微生物有性生殖、轉(zhuǎn)化及轉(zhuǎn)導(dǎo)結(jié)合等研究的基礎(chǔ)上．出現(xiàn)了雜交育種技術(shù)．該技術(shù)是在已知的不同性狀的親本間雜交．故比誘變育種的方向性和自覺性要好．這就為食用菌的定向育種提供了保證。20世紀(jì)60年代出現(xiàn)了細(xì)胞融合技術(shù)．隨著細(xì)胞融合技術(shù)在食用菌育種上的應(yīng)用．使得食用菌育種技術(shù)得到空前的進(jìn)步。20世紀(jì)70年代出現(xiàn)的基因工程技術(shù)給微生物育種帶來了新的革命．它所創(chuàng)造的新物種是自然演化中不可能出現(xiàn)的．作為一種可控的育種手段．必將在食用菌定向育種中發(fā)揮重要作用。
中國食用菌，2006（5）
桂明英1,2，王剛3，郭永紅2，劉蓓2，馬紹賓1(1．云南大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，云南昆明650091；2．昆明食用菌研究所云南昆明650223；3．云南農(nóng)業(yè)大學(xué)圖書館咨詢部云南昆明650201)
一、野生食用茵馴化育種
野生食用菌馴化栽培．是食用菌育種的重要內(nèi)容．栽培的食用菌品種絕大部分是由野生食用菌馴化而來的。例如：阿魏蘑的馴化工作．是中國科學(xué)院新疆生物土壤沙漠研究所于1983年開始的．當(dāng)時(shí)曹玉清、牟川靜、陳忠純等在研究馴化分布于新疆托里地區(qū)的野生阿魏側(cè)耳fP／eurotu~retainel時(shí)，對(duì)其形態(tài)特征、分類地位、氨基酸含量、生活條件(包括營養(yǎng)、pH值、溫度、濕度、光照和通風(fēng))、菌絲培養(yǎng)特征、馴化栽培等進(jìn)行了研究。觀察到分離的野生菌株K001、K002與K005在培養(yǎng)特征上的差異。1986年他們又在新疆木壘采集到Kill標(biāo)本．在進(jìn)一步研究中發(fā)現(xiàn)．K005、Klll在子實(shí)體外部形態(tài)與菌絲培養(yǎng)特征上與阿魏側(cè)耳顯著不同。經(jīng)研究定名為阿魏側(cè)耳托里變種[Pieurotus ervngii(DC．ex． Fr)0ueI．var．tuoliensis Mou．n var]。他們1983年對(duì) K001、K002、K005菌株馴化栽培中．發(fā)現(xiàn)在有無寄主植物阿魏根屑添加在培養(yǎng)基中的情況下．用棉籽殼、云杉木屑、麩皮等原料組成的培養(yǎng)基上都相繼長出了子實(shí)體．阿魏側(cè)耳及托里變種自此得到推廣．首先在新疆開始人工栽培。已成為近年來大面積進(jìn)行商業(yè)性栽培的一種食用菌新品種。其菇體肥大、顏色潔白、菌肉細(xì)膩、質(zhì)地脆嫩、久燉不綿、清爽滑潤、味美可口、營養(yǎng)豐富．投入市場后深受人們的青睞。目前我國引進(jìn)和馴化栽培成功的食用菌已達(dá)80多個(gè)種。
二、 孢子分離育種
單孢分離就是將采集到的孢子群單個(gè)分開培養(yǎng)，讓其單獨(dú)萌發(fā)成菌絲而獲得純培養(yǎng)的方法。曹裕漢通過對(duì)草菇有性分離選育種研究．表明草菇孢子分離菌株在菌絲形態(tài)、生長速率、產(chǎn)厚垣孢子能力、出菇、產(chǎn)量等性狀上存在較大的差異?？梢栽诰z濃密、氣生菌絲多、能產(chǎn)生大量厚垣孢子的菌株中選擇到較高產(chǎn)量的菌株應(yīng)用于生產(chǎn)．解決草菇生產(chǎn)上出現(xiàn)的菌種老化、退化問題：潘保華采用稀釋鏡檢法對(duì)金針菇的6個(gè)品種．共計(jì)l 898個(gè)擔(dān)孢子分離培養(yǎng)．結(jié)果檢測出144個(gè)單孢結(jié)實(shí)菌株。這些菌株與其它非單孢結(jié)實(shí)菌株交配．篩選出6個(gè)強(qiáng)優(yōu)組合。這種通過組織分離．而后經(jīng)出菇或出耳試驗(yàn)，從中篩選出產(chǎn)量高、抗逆性強(qiáng)、遺傳性狀優(yōu)良的菌株再進(jìn)行擴(kuò)大繁殖的育種方法是目前采用最多的一種方法。
三、 食用茵雜交育種
食用菌雜交育種的基本原理是通過單倍體交配實(shí)現(xiàn)基因重組。雜交育種通過選擇適當(dāng)?shù)挠H本進(jìn)行交配．從雜交后代中選育出具有雙親優(yōu)良性狀的菌株，具有一定的定向性．這種育種方法適用于異宗結(jié)合的食用菌。賀建超等以雙孢蘑菇176和2796為親本菌株。通過單孢子雜交育種，經(jīng)過初篩、復(fù)篩和生產(chǎn)性試驗(yàn)．獲得一株新的穩(wěn)定的雙孢蘑菇雜交高產(chǎn)菌株。該雜交菌株具有發(fā)菌快、出菇早、產(chǎn)量高、顏色白、朵形較大、菌肉肥厚、抗逆性較強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。許益財(cái)?shù)冗x擇生態(tài)、種性等差異較大的長白山野生香菇和栽培品種A3-3為親本．采用平板稀釋法進(jìn)行單孢分離．單孢萌發(fā)及單核菌絲鏡檢、配對(duì)。從中選擇優(yōu)良組合“撫香一號(hào)”。該菌株符合育種目標(biāo)，是一個(gè)產(chǎn)量高、菇形圓正、肉厚、內(nèi)實(shí)、抗逆性強(qiáng)、耐高溫、遺傳性狀穩(wěn)定的優(yōu)良品種．可在北方作為更新?lián)Q代的優(yōu)良新品種：劉宇、陳文良等用杏鮑菇l號(hào)菌株和9號(hào)菌株通過單孢雜交育種方法選育出杏鮑菇13號(hào)雜交菌株．杏鮑菇13號(hào)雜交菌株的子實(shí)體產(chǎn)量最高．生物學(xué)效率達(dá)到109．20％。
四、食用茵誘變育種：
誘變育種是人為利用某些理化因子誘導(dǎo)食用菌遺傳因子發(fā)生突變．再從多種突變體中選出正突變菌株的方法。誘變育種是獲得優(yōu)良食用菌菌株的常用手段。目前來看對(duì)食用菌育種較為有效的理化因子包括60co、紫外線、離子束、激光、X射線、超聲波、快中子、亞硝酸、亞硝酸胍、氮芥、硫酸二乙酯等．研究人員根據(jù)各自的實(shí)驗(yàn)條件及不同菌種的特點(diǎn)選擇不同的誘變方法．在食用菌新菌種的選育工作中已取得了不少成果。
4．1 60Co輻射誘變育種
60Co在生物技術(shù)上的應(yīng)用，是育種方法學(xué)的重要發(fā)展。夏志蘭、艾辛等采用60C0射線誘變杏鮑菇菌絲．在輻照劑量為1 000Gy．劑量率為67．8Gy／h的條件下．經(jīng)過拮抗試驗(yàn)和酯酶同功酶電泳驗(yàn)證．選育出一株杏鮑菇新菌株．誘變菌株與供試菌株比較．菌絲積累量差異均達(dá)到極顯著水平；張卉、佟俊生等采用60co-γ射線誘變菌絲，在輻照劑量為1 000Gv．劑量率為67．8Gy／h的條件下。經(jīng)過拮抗試驗(yàn)和酯酶同功酶電泳驗(yàn)證．選育出一株巴西蘑菇新菌株。經(jīng)液體培養(yǎng)其胞外多糖產(chǎn)量較出發(fā)菌株提高12％。
4．2紫外線輻射誘變育種
紫外線是一種非電離輻射誘變劑．是誘變產(chǎn)生突變的重要手段。張淵、王謙等研究了茶薪菇原生質(zhì)體的形成及影響因素．并進(jìn)行了以原生質(zhì)體為材料的誘變育種工作．實(shí)驗(yàn)表明．培養(yǎng)5d的茶薪菇菌絲體酶解3h原生質(zhì)體數(shù)目達(dá)到最大．原生質(zhì)體經(jīng)紫外線照射20see．．致死率即達(dá)70％1~2上。再生菌株經(jīng)篩選后．原生質(zhì)體再生株C16和誘變株 C304產(chǎn)量較對(duì)照分別提高了42．7％和17．9％：李德舜、劉正學(xué)等通過對(duì)平菇“山大1號(hào)”原始菌株的擔(dān)孢子收集、UV誘變以及突變菌株的出菇性能、抗雜菌能力測試研究．從45個(gè)突變菌株中篩選出了2株很有潛力的菌株。6號(hào)菌株株形美觀，抗雜菌能力強(qiáng)、轉(zhuǎn)潮快．生物學(xué)效率較原始菌株提高了約34．3％，達(dá)177．1％；3號(hào)菌株表現(xiàn)為無孢突變，為平菇新品種的研究開發(fā)提供了一個(gè)很好的出發(fā)菌株㈣。
4．3離子注入誘變育種
離子柬誘變育種與傳統(tǒng)的輻射法及化學(xué)誘變劑相比．具有損傷輕、突變率高、突變譜寬、遺傳穩(wěn)定、易于獲得理想菌株等特點(diǎn)。付永前、張軍等對(duì)阿魏菇的孢子采用不同的注入劑量進(jìn)行注入。以抽真空的樣品為對(duì)照，經(jīng)固體培養(yǎng)、液體發(fā)酵后，利用苯酚——濃硫酸法測其胞內(nèi)、胞外多糖含量。經(jīng)反復(fù)的注入和篩選后．獲得了最佳的注入劑量和阿魏多糖高產(chǎn)菌株2a-3．對(duì)此菌株和對(duì)照進(jìn)行液體發(fā)酵．在不同的發(fā)酵時(shí)間內(nèi)對(duì)其發(fā)酵物鮮重及胞內(nèi)、胞外多糖含量進(jìn)行測定．得到了最佳發(fā)酵周期為4d．其胞內(nèi)多糖和胞外多糖含量分別較對(duì)照菌株提高了20．33％和18．53％。
4．4激光誘變育種
激光對(duì)生物體作用的研究已有40多年的歷史．隨著研究水平的深入．目前認(rèn)為，激光對(duì)生物體的影響主要是由于其熱、壓力、光和電磁場等幾方面的效應(yīng)。其中，熱效應(yīng)引起酶失活、蛋白質(zhì)變性，導(dǎo)致生物的生理、遺傳變異；壓力效應(yīng)使組織變形、破裂，引起生理及遺傳變異；電磁場效應(yīng)是由產(chǎn)生的自由基導(dǎo)致DNA損傷。引起突變；而光效應(yīng)則是通過一定波長的光子被吸收、躍遷到一定的能級(jí)。引起生物分子變異。李耀維、張素梅等用 He-Ne激光輻照誘變金針菇(Flammulina Velu． tipes)的原生質(zhì)體、菌絲體片段，分生孢子懸液，并進(jìn)行初篩、復(fù)篩及突變株遺傳穩(wěn)定性研究。結(jié)果表明：采用原生質(zhì)體進(jìn)行誘變．其正突變率、單株 SOD產(chǎn)量提高率、產(chǎn)SOD遺傳穩(wěn)定性均高于菌系體與分生孢子。激光誘變?cè)|(zhì)體是獲得金針菇 SOD高產(chǎn)株的有效途徑㈣；陳五嶺、姚勝利采用 He-Ne激光誘變選育的6株香菇．酯酶同工酶在親本相比。酶帶條紋數(shù)、遷移率等特征發(fā)生了明顯的改變．表明了在激光作用下。香菇菌絲體遺傳物質(zhì)發(fā)生了變異。所選育的香菇新菌種中試栽培結(jié)果表明：新菌種在相同生產(chǎn)條件下。生長周期平均縮短20d以上，香菇產(chǎn)量最低平均提高10％以上．最高可提高22．5％。
4．5空間誘變
空間誘變可以豐富食用菌的種質(zhì)資源．賈建航、邊銀丙將香菇、平菇、黑木耳、金針菇、靈芝等食用菌材料進(jìn)行了衛(wèi)星或高空氣球搭載．隨之進(jìn)行地面實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明，搭載材料在拮抗反應(yīng)、菌絲生長速度、出菇形態(tài)等方面明顯變異。RAPD分析結(jié)果也證實(shí)一些搭載菌株在DNA水平上發(fā)生了變異。以上結(jié)果表明．空間誘變可能為食用菌的遺傳育種提供新途徑。
五、 細(xì)胞融合技術(shù)
細(xì)胞融合技術(shù)是人們按照需要．使兩個(gè)不同遺傳特性的細(xì)胞。融合成一個(gè)新的雜種細(xì)胞．從而人工構(gòu)建新型細(xì)胞．這個(gè)細(xì)胞兼有兩個(gè)親代細(xì)胞的遺傳特性。
李省印、李孟樓等將16個(gè)平菇資源品種的菌絲體，在25℃、pH5．8-6．0環(huán)境下，分別用1．5％溶菌酶加0．6mol／L KCI穩(wěn)滲劑溶解其細(xì)胞壁2h。將獲得的原生質(zhì)體兩兩配對(duì)成39個(gè)組合，在30℃、 pH9、0．6 mol／L KCI穩(wěn)滲劑、不加融合促進(jìn)劑Ca- C12和PEG6000的融合條件下．得到種內(nèi)雜交融合子5株。其中4株融合子再生出菌絲體和子實(shí)體：同皿接種實(shí)驗(yàn)顯示．新菌株與其雙親具明顯的拮抗線。經(jīng)栽培試驗(yàn)與生產(chǎn)示范．新育的“優(yōu)生”1號(hào)品系表現(xiàn)適應(yīng)性強(qiáng)，優(yōu)質(zhì)、豐產(chǎn)、抗雜、耐熱。
平香1號(hào)是河北農(nóng)業(yè)大學(xué)利用細(xì)胞融合技術(shù)．培育的香菇(7402)與平菇(紫飽側(cè)耳)兩個(gè)屬間的遠(yuǎn)緣雜交新品系。平菇與香菇在生物學(xué)分類上分別屬于側(cè)耳屬和香菇屬。前者生長周期短、易栽培、產(chǎn)量高，但品質(zhì)較差；后者味道鮮美。平香一號(hào)細(xì)胞工程株子實(shí)體的氨基酸含量介于雙親之間．比平菇的氨基酸含量有所提高．比香菇的氨基酸含量有所下降。菌株在菌絲生長速度和產(chǎn)量(生物轉(zhuǎn)化率)方面都顯著超過雙親：金風(fēng)2—1是四川省農(nóng)科院土肥所微生物研究室利用獨(dú)創(chuàng)的細(xì)胞融合一融合核分裂技術(shù)，選育得到的金針菇、風(fēng)尾菇的科間雜交后代．它具備了親本金針菇叢生和朵數(shù)多的特點(diǎn)．又具備了風(fēng)尾菇朵大肉厚的特性．同時(shí)它突破了金針菇只能低溫出菇、風(fēng)尾菇只能在中溫條件下出菇的特性．是一個(gè)廣溫性菌株．從1990年開始已經(jīng)在全國19省市和省內(nèi)的60多個(gè)市地州縣大面積推廣應(yīng)用．據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)．已經(jīng)創(chuàng)產(chǎn)值5億元以上。
六、 轉(zhuǎn)基因育種
轉(zhuǎn)基因技術(shù)就是將人工分離和修飾過的基因?qū)氲侥康纳矬w的基因組中．從而達(dá)到改造生物的目的。張競、聶思惟等將MT基因用電擊法轉(zhuǎn)化平菇(Pjeurotu$ostreatusl。MT基因表達(dá)蛋白與金屬離子結(jié)合而形成絡(luò)合物．用Zn誘導(dǎo)．轉(zhuǎn)基因平菇能富集Zn．可對(duì)缺Zn的人群補(bǔ)充Zn．使平菇成為一種保健和治療的食品或蔬菜。出菇試驗(yàn)結(jié)果表明．在米糠與鋸沫比為1：3的培養(yǎng)基上生長．在米糠與鋸沫比為1：4的培養(yǎng)基上不生長。24d菌絲可在廣口瓶中長滿，用于子實(shí)體培養(yǎng)。
回顧食用菌育種方法的歷史．可發(fā)現(xiàn)育種的手段和技術(shù)在不斷發(fā)展和完善。最初人們認(rèn)為食用菌可以馴化。出現(xiàn)了野生食用菌馴化技術(shù)。后來隨著對(duì)遺傳變異現(xiàn)象的認(rèn)識(shí)．出現(xiàn)了誘變育種技術(shù)．提高了微生物自發(fā)突變率，這就為選育高產(chǎn)、耐高溫、多糖含量高的優(yōu)質(zhì)食用菌開辟了新的途徑。幾乎與誘變育種在同一時(shí)期．在對(duì)微生物有性生殖、轉(zhuǎn)化及轉(zhuǎn)導(dǎo)結(jié)合等研究的基礎(chǔ)上．出現(xiàn)了雜交育種技術(shù)．該技術(shù)是在已知的不同性狀的親本間雜交．故比誘變育種的方向性和自覺性要好．這就為食用菌的定向育種提供了保證。20世紀(jì)60年代出現(xiàn)了細(xì)胞融合技術(shù)．隨著細(xì)胞融合技術(shù)在食用菌育種上的應(yīng)用．使得食用菌育種技術(shù)得到空前的進(jìn)步。20世紀(jì)70年代出現(xiàn)的基因工程技術(shù)給微生物育種帶來了新的革命．它所創(chuàng)造的新物種是自然演化中不可能出現(xiàn)的．作為一種可控的育種手段．必將在食用菌定向育種中發(fā)揮重要作用。
中國食用菌，2006（5）
桂明英1,2，王剛3，郭永紅2，劉蓓2，馬紹賓1(1．云南大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，云南昆明650091；2．昆明食用菌研究所云南昆明650223；3．云南農(nóng)業(yè)大學(xué)圖書館咨詢部云南昆明650201)
