平菇孢子分離復(fù)壯技術(shù)：
同一平菇品種經(jīng)過(guò)四年以上栽培就會(huì)表現(xiàn)出一些退化現(xiàn)象。如出菇遲，長(zhǎng)勢(shì)弱，轉(zhuǎn)潮慢，產(chǎn)量不高等。通過(guò)平菇有性繁殖所產(chǎn)生的孢子進(jìn)行母種繁殖是解決種性退化的一條有效途徑。因平菇子實(shí)體孢子彈射量大，接種操作簡(jiǎn)易，在栽培專(zhuān)業(yè)戶(hù)中推廣孢子分離提純復(fù)壯技術(shù)是可行的。
?。保阜N孢子分離與接種
（１）采菇。選擇菇體形態(tài)好，生長(zhǎng)勢(shì)健壯，并能代表該品種性狀接近成熟的平菇子實(shí)體，采摘一叢或兩叢作為復(fù)壯用種菇拿回室內(nèi)備用。要求所采的子實(shí)體菌蓋邊緣稍卷或已接近平展。
（２）裝置與滅菌。用0.2%新潔爾滅清洗干凈3個(gè)1000毫升燒杯和3個(gè)培養(yǎng)皿，烘干水分后將培養(yǎng)皿放入燒杯底部。切取菌蓋長(zhǎng)達(dá)7-9厘米上層或中層的一朵平菇子實(shí)體，用藥棉蘸75%酒精輕擦菌蓋和菌柄后，將菌褶朝下放入燒杯中的培養(yǎng)皿中如有插菇鋼絲架更好。此操作完成后在燒杯口沿上蓋好用無(wú)菌水滴濕的4層沙布，上面再蓋一層白紙，用皮筋扎口，以次類(lèi)推連同3個(gè)同樣處理的燒杯一起放入接種箱。接種箱中另放入30-40支PDA試管培養(yǎng)基，接種鏟、鑷子酒精燈等工具，用10毫升甲醛加6克高錳酸鉀混合后對(duì)接種箱進(jìn)行熏蒸消毒滅菌。
?。ǎ常┙臃N與培養(yǎng)。放入接種箱用于孢子分離的平菇，經(jīng)過(guò)8-12小時(shí)后就有孢子彈出，一般放一晝夜培養(yǎng)皿中就有厚厚一層白色孢子印，這時(shí)要及時(shí)進(jìn)行接種。接種時(shí)雙手用75%酒精擦洗后就可進(jìn)行。先取掉燒杯口上覆蓋的紙和紗布，再用鑷子夾出平菇體，取出培養(yǎng)皿用左手食指和母指夾住皿體，再取一支試管培養(yǎng)基用左手小指和無(wú)名指夾住。右手持接種鏟豎著在酒精燈上灼燒進(jìn)行干熱滅菌，待冷卻后用右手小指及魚(yú)際拔出試管棉塞，用接種鏟從培養(yǎng)皿中央鏟取一些孢子接在試管培養(yǎng)基中央，隨即塞上棉塞即可。一朵菇體彈射的孢子量可接種10支以上試管種。接種完成后貼上標(biāo)簽放入２５℃左右的恒溫箱中培養(yǎng)。培養(yǎng)過(guò)程中，前3-4天為孢子定植期，外表看不出任何變化，7天以后孢子開(kāi)始萌發(fā)并在四周長(zhǎng)出白色絨毛狀菌絲體，16-18天左右菌絲布滿(mǎn)培養(yǎng)基面，即得純菌絲母種。如有污染管應(yīng)及時(shí)棄除。
?。玻N擴(kuò)接
選取10支菌絲潔白、粗壯、生長(zhǎng)整齊的試管種進(jìn)行原種的擴(kuò)接。另20支純菌絲母種等做完出菇試驗(yàn)后再作留種及相關(guān)處理。一支試管種可接5瓶原種，每支試管接完要進(jìn)行火焰干熱滅菌后再擴(kuò)接另一支試管。接種完畢后取出菌種瓶放入25℃左右恒溫箱培養(yǎng)，菌絲滿(mǎn)瓶后10天左右進(jìn)行出菇試驗(yàn)。
３．出菇試驗(yàn)
用常規(guī)棉籽殼等培養(yǎng)基。一般接種10-20袋即可。接種后在適宜溫度下發(fā)菌，菌絲長(zhǎng)滿(mǎn)后移到出菇最佳條件下進(jìn)行觀(guān)察。選菌絲生長(zhǎng)速度快，吃料能力強(qiáng)，出菇早，朵形好，轉(zhuǎn)潮快，產(chǎn)量高，質(zhì)量好，遺傳性狀穩(wěn)定的平菇菌種所出的子實(shí)體再進(jìn)行組織分離培養(yǎng)，方可用于栽培生產(chǎn)。下面具體介紹一下組織分離方法。
組織分離的操作要點(diǎn)：
1.在菇床、菌墻中選擇出菇早、無(wú)雜菌侵染、株型緊湊、圓整肉厚、色澤美觀(guān)、七八成熟的第一潮菇的肥壯菇體作種菇；
2.在種菇中部取最大的3-4張菇片，用70%的酒精輕擦表面后置于接種箱內(nèi)消毒；
3.將菇片縱向撕開(kāi)，在每個(gè)裂面靠近菇片邊緣處取一米粒大小的菇肉組織接于馬鈴薯麩皮培養(yǎng)基上。每張菇片共撕10個(gè)裂面，接10支試管，一次分離共接30-40支試管；
4.將試管置于15-30℃下培養(yǎng)；
5.培養(yǎng)期間每天都要檢查發(fā)菌情況，從中選擇菌絲濃白粗壯、邊緣整齊、長(zhǎng)速正常、無(wú)綠、黃及漿糊狀等雜菌斑點(diǎn)的，表現(xiàn)最好的分離種轉(zhuǎn)接于木屑麩皮培養(yǎng)基上，于15-30℃下培養(yǎng)；
6.菌絲發(fā)滿(mǎn)后，在接種箱內(nèi)去掉棉塞，用蠟封口，用黑膜包裹后于4-9℃的冰箱內(nèi)保藏；
7.在下一個(gè)生產(chǎn)季節(jié)與原始保藏種作對(duì)比試驗(yàn)，擇優(yōu)作為生產(chǎn)用種。每季都如此復(fù)壯，能逐步提高菌種各方面的性狀，使發(fā)菌加快，抗逆抗雜性增強(qiáng)，質(zhì)量明顯提高。
同一平菇品種經(jīng)過(guò)四年以上栽培就會(huì)表現(xiàn)出一些退化現(xiàn)象。如出菇遲，長(zhǎng)勢(shì)弱，轉(zhuǎn)潮慢，產(chǎn)量不高等。通過(guò)平菇有性繁殖所產(chǎn)生的孢子進(jìn)行母種繁殖是解決種性退化的一條有效途徑。因平菇子實(shí)體孢子彈射量大，接種操作簡(jiǎn)易，在栽培專(zhuān)業(yè)戶(hù)中推廣孢子分離提純復(fù)壯技術(shù)是可行的。
?。保阜N孢子分離與接種
（１）采菇。選擇菇體形態(tài)好，生長(zhǎng)勢(shì)健壯，并能代表該品種性狀接近成熟的平菇子實(shí)體，采摘一叢或兩叢作為復(fù)壯用種菇拿回室內(nèi)備用。要求所采的子實(shí)體菌蓋邊緣稍卷或已接近平展。
（２）裝置與滅菌。用0.2%新潔爾滅清洗干凈3個(gè)1000毫升燒杯和3個(gè)培養(yǎng)皿，烘干水分后將培養(yǎng)皿放入燒杯底部。切取菌蓋長(zhǎng)達(dá)7-9厘米上層或中層的一朵平菇子實(shí)體，用藥棉蘸75%酒精輕擦菌蓋和菌柄后，將菌褶朝下放入燒杯中的培養(yǎng)皿中如有插菇鋼絲架更好。此操作完成后在燒杯口沿上蓋好用無(wú)菌水滴濕的4層沙布，上面再蓋一層白紙，用皮筋扎口，以次類(lèi)推連同3個(gè)同樣處理的燒杯一起放入接種箱。接種箱中另放入30-40支PDA試管培養(yǎng)基，接種鏟、鑷子酒精燈等工具，用10毫升甲醛加6克高錳酸鉀混合后對(duì)接種箱進(jìn)行熏蒸消毒滅菌。
?。ǎ常┙臃N與培養(yǎng)。放入接種箱用于孢子分離的平菇，經(jīng)過(guò)8-12小時(shí)后就有孢子彈出，一般放一晝夜培養(yǎng)皿中就有厚厚一層白色孢子印，這時(shí)要及時(shí)進(jìn)行接種。接種時(shí)雙手用75%酒精擦洗后就可進(jìn)行。先取掉燒杯口上覆蓋的紙和紗布，再用鑷子夾出平菇體，取出培養(yǎng)皿用左手食指和母指夾住皿體，再取一支試管培養(yǎng)基用左手小指和無(wú)名指夾住。右手持接種鏟豎著在酒精燈上灼燒進(jìn)行干熱滅菌，待冷卻后用右手小指及魚(yú)際拔出試管棉塞，用接種鏟從培養(yǎng)皿中央鏟取一些孢子接在試管培養(yǎng)基中央，隨即塞上棉塞即可。一朵菇體彈射的孢子量可接種10支以上試管種。接種完成后貼上標(biāo)簽放入２５℃左右的恒溫箱中培養(yǎng)。培養(yǎng)過(guò)程中，前3-4天為孢子定植期，外表看不出任何變化，7天以后孢子開(kāi)始萌發(fā)并在四周長(zhǎng)出白色絨毛狀菌絲體，16-18天左右菌絲布滿(mǎn)培養(yǎng)基面，即得純菌絲母種。如有污染管應(yīng)及時(shí)棄除。
?。玻N擴(kuò)接
選取10支菌絲潔白、粗壯、生長(zhǎng)整齊的試管種進(jìn)行原種的擴(kuò)接。另20支純菌絲母種等做完出菇試驗(yàn)后再作留種及相關(guān)處理。一支試管種可接5瓶原種，每支試管接完要進(jìn)行火焰干熱滅菌后再擴(kuò)接另一支試管。接種完畢后取出菌種瓶放入25℃左右恒溫箱培養(yǎng)，菌絲滿(mǎn)瓶后10天左右進(jìn)行出菇試驗(yàn)。
３．出菇試驗(yàn)
用常規(guī)棉籽殼等培養(yǎng)基。一般接種10-20袋即可。接種后在適宜溫度下發(fā)菌，菌絲長(zhǎng)滿(mǎn)后移到出菇最佳條件下進(jìn)行觀(guān)察。選菌絲生長(zhǎng)速度快，吃料能力強(qiáng)，出菇早，朵形好，轉(zhuǎn)潮快，產(chǎn)量高，質(zhì)量好，遺傳性狀穩(wěn)定的平菇菌種所出的子實(shí)體再進(jìn)行組織分離培養(yǎng)，方可用于栽培生產(chǎn)。下面具體介紹一下組織分離方法。
組織分離的操作要點(diǎn)：
1.在菇床、菌墻中選擇出菇早、無(wú)雜菌侵染、株型緊湊、圓整肉厚、色澤美觀(guān)、七八成熟的第一潮菇的肥壯菇體作種菇；
2.在種菇中部取最大的3-4張菇片，用70%的酒精輕擦表面后置于接種箱內(nèi)消毒；
3.將菇片縱向撕開(kāi)，在每個(gè)裂面靠近菇片邊緣處取一米粒大小的菇肉組織接于馬鈴薯麩皮培養(yǎng)基上。每張菇片共撕10個(gè)裂面，接10支試管，一次分離共接30-40支試管；
4.將試管置于15-30℃下培養(yǎng)；
5.培養(yǎng)期間每天都要檢查發(fā)菌情況，從中選擇菌絲濃白粗壯、邊緣整齊、長(zhǎng)速正常、無(wú)綠、黃及漿糊狀等雜菌斑點(diǎn)的，表現(xiàn)最好的分離種轉(zhuǎn)接于木屑麩皮培養(yǎng)基上，于15-30℃下培養(yǎng)；
6.菌絲發(fā)滿(mǎn)后，在接種箱內(nèi)去掉棉塞，用蠟封口，用黑膜包裹后于4-9℃的冰箱內(nèi)保藏；
7.在下一個(gè)生產(chǎn)季節(jié)與原始保藏種作對(duì)比試驗(yàn)，擇優(yōu)作為生產(chǎn)用種。每季都如此復(fù)壯，能逐步提高菌種各方面的性狀，使發(fā)菌加快，抗逆抗雜性增強(qiáng)，質(zhì)量明顯提高。
