【作者】孫曉紅 馮愛(ài)萍 陳明杰 潘迎捷

【機(jī)構(gòu)】南京農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所 上海水產(chǎn)大學(xué) 南京210095上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所 上海201106上海200090

【摘要】利用差異顯示技術(shù)分離獲得草菇低溫特異DNA片段,經(jīng)與正常草菇和低溫誘導(dǎo)草菇cDNA分別southern雜交驗(yàn)證后,得到低溫特異性片段。采用PCR標(biāo)記技術(shù)對(duì)獲得的低溫特異性片段進(jìn)行DIG標(biāo)記,以此為探針,對(duì)低溫處理的草菇cDNA文庫(kù)進(jìn)行篩選,獲得4個(gè)陽(yáng)性克隆,分別進(jìn)行測(cè)序。序列同源性比較分析發(fā)現(xiàn),Cor3基因與s-腺苷-L-高半胱氨酸水解酶有很高的同源性,Cor4基因與40S核糖體蛋白S9有很高的同源性,這兩個(gè)基因可能與草菇的低溫自溶現(xiàn)象有關(guān)。Cor1基因與脈孢菌的保守假設(shè)蛋白(conservedhypotheticalprotein)有同源性,Cor2基因與輔酶A連接酶有同源性。半定量RT-PCR驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)Cor1和Cor2基因在正常情況下沒(méi)有表達(dá),低溫處理后有表達(dá),Cor3和Cor4基因在正常情況下有表達(dá),低溫處理后表達(dá)量增加。  

【基金】上海市科學(xué)技術(shù)發(fā)展基金資助； 項(xiàng)目編號(hào):003912076；

【關(guān)鍵詞】低溫特異性片斷; 低溫cDNA文庫(kù); 半定量RT-PCR;