【作者】李梅 吳小波 李萌 呂聰 董旭杰 曹福祥
【機(jī)構(gòu)】中南林業(yè)科技大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院 湖南省環(huán)境資源植物開發(fā)與利用工程技術(shù)研究中心
摘要:以漆酶活性為指標(biāo),利用不同果皮為基質(zhì)對(duì)糙皮側(cè)耳(Pleurotus ostreatus)固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)漆酶的條件進(jìn)行優(yōu)化并對(duì)所產(chǎn)漆酶進(jìn)行純化,研究純化后漆酶的酶學(xué)性質(zhì)。結(jié)果表明:以柚皮為培養(yǎng)基質(zhì)(5g柚皮、25mL水、20μL吐溫-80),30℃固態(tài)發(fā)酵10d,糙皮側(cè)耳產(chǎn)漆酶的活性最高,比活力為21800U/g;在該條件下將糙皮側(cè)耳所產(chǎn)漆酶的粗酶液用硫酸銨沉淀、透析、濃縮、DEAE-纖維離子交換柱層析得到漆酶蛋白單一條帶,SDS-PAGE檢測(cè)蛋白相對(duì)分子質(zhì)量約66000;該漆酶命名為Lac h2,其最適反應(yīng)溫度為60℃,最適反應(yīng)pH值為4.5;在30~50℃,pH 4.5~6.0范圍內(nèi)穩(wěn)定;金屬離子Zn2+、Mn2+、Cu2+和Mg2+對(duì)純化的漆酶Lac h2的酶活力有促進(jìn)作用而Ca2+、Ag+和Fe2+對(duì)Lac h2的酶活力有抑制作用。
基金:湖南省科技廳重點(diǎn)研發(fā)項(xiàng)目(2016NK2143);
關(guān)鍵詞:漆酶; 柚皮; 純化; 酶學(xué)性質(zhì);