二、液體菌種生產(chǎn)的關(guān)鍵技術(shù)
1、溶氧量
液體菌種生產(chǎn)中最關(guān)鍵的是培養(yǎng)液中氧的溶解量,因為在菌絲生長過程中,必須不斷的吸收溶解其中的氧氣來維持自身的新陳代謝,氧氣在液體(水)中的溶解量與壓力、溫度有關(guān),同時與培養(yǎng)液的接觸面積、滲透壓有很大的關(guān)系。 因此我們設(shè)計發(fā)酵設(shè)備時有效地解決了這些問題,如安裝射流器使氣泡細(xì)碎度增加等。
2、空氣過濾
技術(shù)的關(guān)鍵就是保證進(jìn)入的空氣無菌度高,因此必須選擇孔徑小、材料先進(jìn)的過濾膜。一般細(xì)菌直徑在0.5-5um,酵母菌在1-10um,病毒一般在20-400mu,所以選擇過濾膜時應(yīng)綜合考慮以上因素。當(dāng)然如果選的太小,成本將大幅度提高。另外環(huán)境對于空氣影響很大,在空氣壓縮機(jī)房、制種車間必須保持環(huán)境清潔。
3、培養(yǎng)液
培養(yǎng)液是菌絲生長發(fā)育的營養(yǎng)源,要求營養(yǎng)全面均衡。不同的菌種對營養(yǎng)要求偏重不同。配制原料有糖、麩皮、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、維生素、蛋白胨、土豆汁、酵母浸膏等。配置培養(yǎng)液時,先將土豆片、麩皮一起煮熟,將汁液濾出,后加入其它輔料混勻即可。
4、接種
培養(yǎng)器上端有接種口,也是裝料口,將母種并瓶后加入抑菌劑,而后必須在火焰圈的保護(hù)下倒入罐體內(nèi),要求動作快、操作準(zhǔn)確。
5、環(huán)境
如前所述,環(huán)境對菌種生產(chǎn)影響很大,過濾器本身不可能把雜菌百分之百地濾掉,減少環(huán)境中的雜菌基數(shù)是非常重要的,液體菌種母種接入到經(jīng)滅菌的培養(yǎng)液中只要能形成對雜菌的生長優(yōu)勢就可以抑制雜菌感染,也就是說,液體菌種培養(yǎng)不是建立在絕對無菌的前提下相反是建立在相對無菌的前提下。就此意義上說,保持環(huán)境清潔,減少空氣中雜菌基數(shù),對于提高菌種培養(yǎng)成功率意義較大。
三、 液體菌種生產(chǎn)流程
工藝流程圖: 空氣壓縮→過濾
↓
配料→裝罐→滅菌→冷卻→接種→培養(yǎng)→液體種
↑
試管斜面種→ 三角瓶顆粒種
配料時先將土豆去皮切片,與麩皮混合后用不銹鋼鍋煮熟并取汁,在將輔料KH2PO4、MgSO4等溶入,混勻后裝入罐中加熱,至121.3℃并維持40分鐘左右進(jìn)行滅菌,滅菌結(jié)束后用冷水冷卻至培養(yǎng)溫度,而后將并瓶后的三角瓶種接上進(jìn)行培養(yǎng),培養(yǎng)時根據(jù)不同的菌種,設(shè)定適宜的溫度。
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