(1)培養(yǎng)基的分類
①按成分不同分類
天然培養(yǎng)基:指以天然物質(zhì)為培養(yǎng)原料的培養(yǎng)基。常用的有馬鈴薯、豆芽汁、麥芽汁、玉米粉、麥麩、清糠、牛肉膏、蛋白胨、棉籽殼、木屑等。一合成培養(yǎng)基:用化學(xué)藥物配制而成的培養(yǎng)基,一般見于研究性的培養(yǎng)基。如實驗?zāi)撤N食用菌能利用哪種碳源,就選用各種有關(guān)的化學(xué)藥材,分別制成各種培養(yǎng)基,觀察實驗菌種的生長情況。半合成培養(yǎng)基:以天然材料和化學(xué)藥物混合配制而成的培養(yǎng)基。
②按菌種擴大形式分類
母種培養(yǎng)基:即常用的斜面培養(yǎng)基。廣州等地介紹用枝條代替斜面培養(yǎng)基,這種枝條培養(yǎng)基也屬母種培養(yǎng)基。原種培養(yǎng)基:即一般食用菌生產(chǎn)中的原種瓶子培養(yǎng)基。用于母種擴大培養(yǎng)。栽培種培養(yǎng)基:與原種培養(yǎng)基同。
③按物理性狀分類液體培養(yǎng)基;固體培養(yǎng)基;半固體培養(yǎng)基。
(2)配制方法
①容器準(zhǔn)備。食用菌生產(chǎn)中常用的容器為試管(制母種用),瓶子、塑料袋(制原種、栽培種用)。玻璃容器準(zhǔn)備:玻璃容器最好先用肥皂粉泡水洗滌(使用過的試管最好煮沸處理)。若容器中附著有機物、油垢等,應(yīng)先用去污粉擦洗。對舊的玻璃容器,特別是已染菌的容器,應(yīng)先在漂白粉液中浸泡,然后用清水沖洗。一些早已洗凈而過久堆放的瓶子,使用前,最好用1/1000-1/5000的高錳酸鉀液處理。
棉塞的做法與要求,先扯一塊夠大的棉花,拿在左手中。然后,以右手順序多次將棉花鋪于左手中的第一、二、三……層棉花上。要求每次加入的棉花均比前一次小,且每層的棉花四周基本扯成圓形。已通過拇食兩指圓圈的前端,成為表面光滑,且較堅硬的棉塞。然后,用左手將尚露在拇食兩指圓圈表面的棉花轉(zhuǎn)折成光滑且較堅硬的棉塞另一頭。并將此頭塞入試管或瓶內(nèi),塞緊即成為兩頭光滑無褶皺的棉塞。
棉塞應(yīng)兩頭要光滑,特別是進入容器內(nèi)的這一頭,更應(yīng)光滑無褶縫;棉塞的大小要與容器口的大小相吻合,不可太緊,亦不可太松;棉塞的2/3應(yīng)塞入容器內(nèi),1/3留在容器口外。采用高壓滅菌的應(yīng)選用聚丙烯塑料袋,采用常壓滅菌的可選用聚乙烯塑料袋。塑料袋的大小可根據(jù)生產(chǎn)的要求進行選擇。現(xiàn)在有專業(yè)工廠可為各食用菌栽培單位提供不同規(guī)格的塑料袋。為節(jié)約開支,也可自制。
②配制方法
母種培養(yǎng)基:
配方為馬鈴薯(去皮)20%、葡萄糖2%、瓊脂2%、水適量。制法是選不出芽、不爛的優(yōu)質(zhì)馬鈴薯,洗凈去皮,按需要量稱?。ㄓ醒康囊獙⒀客诘簦⒎Q好的馬鈴薯切成薄片,放入鋁鍋中,按20克馬鈴薯加100毫升水的比例加入清水。加熱煮沸,維持20分鐘。用四層紗布過濾,取其汁液。稱取瓊脂,先在水中泡浸洗凈后加入馬鈴薯的汁液中,繼續(xù)加熱溶化。加入規(guī)定量的葡萄糖,并用熱水補足到規(guī)定水量。按各種菌種對pH的要求范圍,將上述培養(yǎng)基用5%的稀鹽酸或5%的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)。趁熱迅速將上述培養(yǎng)基試管,裝量約為試管長度的1/5。注意管口不要沾上培養(yǎng)基。
清潔試管口,塞上棉塞(棉塞松緊要適度,塞入試管的長度約為棉塞全長的2/3)。將塞好棉塞的試管直立,蓋上牛皮紙,以粗線扎好。滅菌結(jié)束后取出,趁熱將培養(yǎng)基放成斜面(即先在桌上放一木條,然后將試管一頭擱在木條上,試管底靠桌子,使試管成一斜向。此時,可見管內(nèi)培養(yǎng)基向上傾斜,應(yīng)掌握整個培養(yǎng)基斜面長度不超過試管總長度的一半)。冷卻凝固后即成斜面培養(yǎng)基,供母種接種用。有條件的,應(yīng)對上述斜面進行無菌測定,檢驗滅菌是否徹底。方法是選取幾支已滅菌的斜面,放入30℃左右恒溫箱中培養(yǎng)3-5天。若未見斜面上長出雜菌,即可使用。
原種、栽培種培養(yǎng)基:一般食用菌的原種和栽培種培養(yǎng)基的配方及配制方法基本一致。其配方為雜木屑78%、糠20%、蔗糖1%、石膏1%、水適量。制法是選取無芳香味的、干燥無霉變的木屑,篩去木片、木條。取定量米糠先與定量石膏拌勻,然后加入木屑中充分拌勻。將蔗糖加入水中,溶解后加入木屑料中拌和,再加入適量清水。要求手緊握料時,指縫間有水而不下滴為度。裝瓶(或裝入塑料袋)時,以特制的扁彎鐵鉤壓實木屑料,但不宜過緊,一般以瓶子倒懸而料不掉出為度(裝料高度以達(dá)瓶肩為宜)??蓪⒘弦褖簩嵉钠孔涌趦A入清水中,轉(zhuǎn)動瓶子,洗除瓶肩上沾住的木屑及外壁的木屑。待瓶口水跡稍千后,塞上棉塞,再包上牛皮紙或塑料薄膜(聚丙烯)。
目前,不少地區(qū)采用玉米粒為原料,制作原種和栽培種。實踐證明,此法具有生長速度快,發(fā)菌旺盛的特點。較麥粒種制作更簡便,成品率也較麥粒種高。從節(jié)約用糧角度出發(fā),玉米屬粗糧,故比以細(xì)糧小麥制種更為妥當(dāng)。制法是將玉米粒以水浸泡24小時以上,冬季最好能放在較暖的環(huán)境下浸泡,夏天浸泡時間可適當(dāng)縮短。撈起已浸泡好的玉米,放入鍋內(nèi)加水煮熟,要求煮到食之無生腥味、質(zhì)軟而韌為度。將煮熟后的玉米置于紗布上,吸去表面水分后立即裝瓶,每瓶不宜裝料過多,一般1公斤干玉米可裝六瓶種(750克蘑菇瓶)。裝好玉米的瓶口,塞上棉塞,并以牛皮紙包扎,于20磅壓力下,滅菌1小時,或在常壓條件下,煮沸后再保持6小時以上沸騰。然后,取出冷卻到30℃左右,送入接種箱,行搶溫接種。
①按成分不同分類
天然培養(yǎng)基:指以天然物質(zhì)為培養(yǎng)原料的培養(yǎng)基。常用的有馬鈴薯、豆芽汁、麥芽汁、玉米粉、麥麩、清糠、牛肉膏、蛋白胨、棉籽殼、木屑等。一合成培養(yǎng)基:用化學(xué)藥物配制而成的培養(yǎng)基,一般見于研究性的培養(yǎng)基。如實驗?zāi)撤N食用菌能利用哪種碳源,就選用各種有關(guān)的化學(xué)藥材,分別制成各種培養(yǎng)基,觀察實驗菌種的生長情況。半合成培養(yǎng)基:以天然材料和化學(xué)藥物混合配制而成的培養(yǎng)基。
②按菌種擴大形式分類
母種培養(yǎng)基:即常用的斜面培養(yǎng)基。廣州等地介紹用枝條代替斜面培養(yǎng)基,這種枝條培養(yǎng)基也屬母種培養(yǎng)基。原種培養(yǎng)基:即一般食用菌生產(chǎn)中的原種瓶子培養(yǎng)基。用于母種擴大培養(yǎng)。栽培種培養(yǎng)基:與原種培養(yǎng)基同。
③按物理性狀分類液體培養(yǎng)基;固體培養(yǎng)基;半固體培養(yǎng)基。
(2)配制方法
①容器準(zhǔn)備。食用菌生產(chǎn)中常用的容器為試管(制母種用),瓶子、塑料袋(制原種、栽培種用)。玻璃容器準(zhǔn)備:玻璃容器最好先用肥皂粉泡水洗滌(使用過的試管最好煮沸處理)。若容器中附著有機物、油垢等,應(yīng)先用去污粉擦洗。對舊的玻璃容器,特別是已染菌的容器,應(yīng)先在漂白粉液中浸泡,然后用清水沖洗。一些早已洗凈而過久堆放的瓶子,使用前,最好用1/1000-1/5000的高錳酸鉀液處理。
棉塞的做法與要求,先扯一塊夠大的棉花,拿在左手中。然后,以右手順序多次將棉花鋪于左手中的第一、二、三……層棉花上。要求每次加入的棉花均比前一次小,且每層的棉花四周基本扯成圓形。已通過拇食兩指圓圈的前端,成為表面光滑,且較堅硬的棉塞。然后,用左手將尚露在拇食兩指圓圈表面的棉花轉(zhuǎn)折成光滑且較堅硬的棉塞另一頭。并將此頭塞入試管或瓶內(nèi),塞緊即成為兩頭光滑無褶皺的棉塞。
棉塞應(yīng)兩頭要光滑,特別是進入容器內(nèi)的這一頭,更應(yīng)光滑無褶縫;棉塞的大小要與容器口的大小相吻合,不可太緊,亦不可太松;棉塞的2/3應(yīng)塞入容器內(nèi),1/3留在容器口外。采用高壓滅菌的應(yīng)選用聚丙烯塑料袋,采用常壓滅菌的可選用聚乙烯塑料袋。塑料袋的大小可根據(jù)生產(chǎn)的要求進行選擇。現(xiàn)在有專業(yè)工廠可為各食用菌栽培單位提供不同規(guī)格的塑料袋。為節(jié)約開支,也可自制。
②配制方法
母種培養(yǎng)基:
配方為馬鈴薯(去皮)20%、葡萄糖2%、瓊脂2%、水適量。制法是選不出芽、不爛的優(yōu)質(zhì)馬鈴薯,洗凈去皮,按需要量稱?。ㄓ醒康囊獙⒀客诘簦⒎Q好的馬鈴薯切成薄片,放入鋁鍋中,按20克馬鈴薯加100毫升水的比例加入清水。加熱煮沸,維持20分鐘。用四層紗布過濾,取其汁液。稱取瓊脂,先在水中泡浸洗凈后加入馬鈴薯的汁液中,繼續(xù)加熱溶化。加入規(guī)定量的葡萄糖,并用熱水補足到規(guī)定水量。按各種菌種對pH的要求范圍,將上述培養(yǎng)基用5%的稀鹽酸或5%的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)。趁熱迅速將上述培養(yǎng)基試管,裝量約為試管長度的1/5。注意管口不要沾上培養(yǎng)基。
清潔試管口,塞上棉塞(棉塞松緊要適度,塞入試管的長度約為棉塞全長的2/3)。將塞好棉塞的試管直立,蓋上牛皮紙,以粗線扎好。滅菌結(jié)束后取出,趁熱將培養(yǎng)基放成斜面(即先在桌上放一木條,然后將試管一頭擱在木條上,試管底靠桌子,使試管成一斜向。此時,可見管內(nèi)培養(yǎng)基向上傾斜,應(yīng)掌握整個培養(yǎng)基斜面長度不超過試管總長度的一半)。冷卻凝固后即成斜面培養(yǎng)基,供母種接種用。有條件的,應(yīng)對上述斜面進行無菌測定,檢驗滅菌是否徹底。方法是選取幾支已滅菌的斜面,放入30℃左右恒溫箱中培養(yǎng)3-5天。若未見斜面上長出雜菌,即可使用。
原種、栽培種培養(yǎng)基:一般食用菌的原種和栽培種培養(yǎng)基的配方及配制方法基本一致。其配方為雜木屑78%、糠20%、蔗糖1%、石膏1%、水適量。制法是選取無芳香味的、干燥無霉變的木屑,篩去木片、木條。取定量米糠先與定量石膏拌勻,然后加入木屑中充分拌勻。將蔗糖加入水中,溶解后加入木屑料中拌和,再加入適量清水。要求手緊握料時,指縫間有水而不下滴為度。裝瓶(或裝入塑料袋)時,以特制的扁彎鐵鉤壓實木屑料,但不宜過緊,一般以瓶子倒懸而料不掉出為度(裝料高度以達(dá)瓶肩為宜)??蓪⒘弦褖簩嵉钠孔涌趦A入清水中,轉(zhuǎn)動瓶子,洗除瓶肩上沾住的木屑及外壁的木屑。待瓶口水跡稍千后,塞上棉塞,再包上牛皮紙或塑料薄膜(聚丙烯)。
目前,不少地區(qū)采用玉米粒為原料,制作原種和栽培種。實踐證明,此法具有生長速度快,發(fā)菌旺盛的特點。較麥粒種制作更簡便,成品率也較麥粒種高。從節(jié)約用糧角度出發(fā),玉米屬粗糧,故比以細(xì)糧小麥制種更為妥當(dāng)。制法是將玉米粒以水浸泡24小時以上,冬季最好能放在較暖的環(huán)境下浸泡,夏天浸泡時間可適當(dāng)縮短。撈起已浸泡好的玉米,放入鍋內(nèi)加水煮熟,要求煮到食之無生腥味、質(zhì)軟而韌為度。將煮熟后的玉米置于紗布上,吸去表面水分后立即裝瓶,每瓶不宜裝料過多,一般1公斤干玉米可裝六瓶種(750克蘑菇瓶)。裝好玉米的瓶口,塞上棉塞,并以牛皮紙包扎,于20磅壓力下,滅菌1小時,或在常壓條件下,煮沸后再保持6小時以上沸騰。然后,取出冷卻到30℃左右,送入接種箱,行搶溫接種。