常規(guī)生產(chǎn)麥粒菌種時,一般都不對菌種瓶中的麥粒培養(yǎng)基進(jìn)行固定,裝有麥粒培養(yǎng)基的菌種瓶在滅菌、接種和搬運(yùn)過程中如不能保持豎立狀態(tài),麥粒培養(yǎng)基容易與棉塞接觸,并將水分傳導(dǎo)至棉塞和封口紙,使棉塞和封口紙潮濕。潮濕的封口紙和棉塞極易遭受外界雜菌的侵染,使雜菌能通過封口紙和棉塞的阻隔進(jìn)入菌種瓶而污染麥粒培養(yǎng)基,因此菌種的雜菌污染率較高。另一方面,由于接種時菌種只能接種在麥粒培養(yǎng)基表面,菌絲只能從上往下長,培養(yǎng)時間較長,能源消耗量大,不但增加了制種成本,也增大了雜菌污染的機(jī)率。
筆者在進(jìn)行麥粒菌種制種實踐中摸索出一套新技術(shù),即對瓶裝麥粒培養(yǎng)基進(jìn)行固定,防止麥粒培養(yǎng)基在菌種瓶側(cè)放時與棉塞接觸,并在麥粒培養(yǎng)基中間鉆一通氣-接種孔直達(dá)菌種瓶底部,接種時同時在通氣-接種孔底部和麥粒培養(yǎng)基表面接種菌種。
與常規(guī)制種方法相比,麥粒培養(yǎng)基被固定在菌種瓶中后,在滅菌、接種和搬運(yùn)過程中將菌種瓶側(cè)放時,菌種瓶中的培養(yǎng)基不會發(fā)生移動,培養(yǎng)基和棉塞不能相互接觸,避免了培養(yǎng)基中的水分通過接觸而傳導(dǎo)至棉塞,使棉塞和封口紙始終能保持干燥狀態(tài)。因雜菌孢子不可能在干燥的封口紙上萌發(fā),這樣棉塞和封口紙就能對空氣中的雜菌孢子發(fā)揮阻隔作用,有效防止培養(yǎng)基受雜菌污染,麥粒菌種的雜菌污染率由3%以上降至0.2%左右。
在培養(yǎng)基中間鉆有通氣接種孔,便可將菌種同時接種在培養(yǎng)基底部和上部,菌種在培養(yǎng)基的上下層同時萌發(fā)生長,既可省去老法制種中搖動培養(yǎng)基來分散菌種的工作,又達(dá)到縮短培養(yǎng)時間和降低能耗之目的,使菌種在溫室的培養(yǎng)時間縮短約1/3,溫室培養(yǎng)過程中的能源消耗節(jié)省近1/3。
現(xiàn)將食用菌麥粒培養(yǎng)基鉆通氣-接種孔固定培養(yǎng)技術(shù)介紹如下。
一、麥粒培養(yǎng)基的制備
(一)麥粒培養(yǎng)基的配方小麥粒99%,碳酸鈣1%。
(二)麥粒培養(yǎng)基的制作和裝瓶小麥粒淘洗干凈后用清水浸泡12小時,然后沸煮15分鐘,撈出攤開晾干表面水分后拌入碳酸鈣并裝入菌種瓶,一般裝至瓶肩以下1.5~2CM即可。
二、麥粒培養(yǎng)基的固定和鉆孔
(一)固定用料的配制固定用料采用木屑培養(yǎng)基,其配方為:闊葉樹木屑78%,麥麩20%,蔗糖、石膏粉各1%,水適量。原料按比例混合均勻,加水量掌握在用手緊握木屑培養(yǎng)基時手指縫間有水滲出但不下滴的程度為宜。
(二)麥粒培養(yǎng)基的固定方法在菌種瓶的麥粒培養(yǎng)基上面裝滿木屑培養(yǎng)基,然后用扁鐵鉤向下壓實、整平。木屑培養(yǎng)基用量以壓實、整平后剛好達(dá)菌種瓶的瓶肩部為宜。
(三)在麥粒培養(yǎng)基中鉆通氣-接種孔用直徑1.2~1.5的尖頭圓木棍從培養(yǎng)基表面中間向瓶底鉆一通氣-接種孔。鉆孔需反復(fù)多次才可鉆成。第1次鉆孔后再向瓶中裝入少量木屑培養(yǎng)基,并用鉆孔棍邊鉆孔邊撥入孔中。每次鉆孔后退出木棍時邊旋轉(zhuǎn)邊退,避免將孔壁上的培養(yǎng)基拉松。如此反復(fù)3~4次,直至培養(yǎng)基中間形成由木屑培養(yǎng)基構(gòu)成的較牢固的孔壁。最后再用扁鐵鉤對培養(yǎng)基表面稍加整壓。
?。ㄋ模┚N瓶的清洗和封口將菌種瓶瓶口向下斜放入清水中,清洗瓶外壁和培養(yǎng)基以上的瓶內(nèi)壁上附著的木屑培養(yǎng)基。待瓶口水分干后在瓶口上塞入棉塞,并用牛皮紙包扎瓶口。
三、培養(yǎng)基的滅菌
將瓶裝麥粒培養(yǎng)基裝入高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)滅菌,在1.5KG/CM2壓力、121~126℃的溫度下滅菌2小時。
四、接種和培養(yǎng)
在接種箱內(nèi)接種。接種時挖取花生粒至蠶豆粒大的菌種塊,分別接種到處理通氣-接種孔底部和培養(yǎng)基表面。接種后置于溫室中在27℃的恒溫下培養(yǎng),15~18天后菌絲即可長滿全瓶。
五、適用范圍
此法適宜于進(jìn)行瓶裝的食用菌麥粒菌種制種。塑料袋裝的麥粒菌種因塑料袋外壁柔軟,固定好的麥粒培養(yǎng)基易在滅菌、接種和搬運(yùn)過程中因碰撞、擠壓而變形,難以保持固定狀態(tài),因此不適用此法制種。